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正確對待他們!– 存儲和使用抗體的最佳實踐

抗體的不正確管理和儲存可能對其性能產生重大影響。本文討論了一些存儲和使用抗體的最佳實踐,以便在您的實驗中充分利用它們。

太熱而無法處理?

在儲存抗體時,您應始終參考產品特定數據表并遵循制造商的說明,因為任何抗體都必須在正確的溫度下儲存。不這樣做可能會導致性能下降并使任何制造商的保證失效。不同溫度下的穩定性很大程度上取決于抗體的形式和配方。 

抗體也可能有多個推薦的儲存溫度,具體取決于您希望儲存的時間長度。例如,我們大多數抗體的標簽和數據表都將“+4oC 或 -20 oC(如果首選)”作為推薦的儲存條件。這是因為大多數抗體可以在 +4oC 下保存很短的時間,通常是幾周,但應該在 -20oC 下長期保存。

提供的凍干抗體在凍干時和復溶后可能有不同的推薦儲存條件。如果您使用的是凍干抗體,請查看數據表,了解重構前后推薦的儲存條件。

一些抗體只有一種推薦的儲存溫度。例如,不含任何抗微生物劑(如疊氮化鈉或硫柳汞)的抗體只能冷凍(通常為 -70oC 或更低)儲存,以減少微生物生長的可能性。  

血清和腹水應冷凍保存,因為它們含有可以降解蛋白質(包括抗體)的蛋白酶。冷凍儲存有助于最大限度地降低蛋白酶活性并防止抗體在儲存過程中降解。

相反,酶偶聯抗體,例如 HRP 偶聯抗體,通常不應冷凍。冷凍和解凍這些抗體會降低酶的催化活性,從而在與底物一起孵育時導致信號減弱。

分而治之

與冷凍和解凍相關的溫度波動會導致抗體變性和聚集,從而削弱其與其靶標結合的能力。為了減少凍融循環的次數,應按照制造商的說明對抗體進行分裝和儲存。此外,抗體應始終儲存在低溫冰箱或冰柜的后部,因為與前部或門相比,該區域受溫度波動的影響較小。您還應該避免將等分試樣存放在無霜冰箱中,因為它們會經歷溫度波動的循環,以避免結冰。

理想情況下,每個等分試樣應包含實驗中使用的抗體體積,因此不需要重新冷凍。但是,小體積對濃度波動和蒸發更敏感,因此建議體積至少應為 10 μl。

當以高濃度儲存時,抗體不太可能降解或與血管壁結合。因此,不建議在分裝前稀釋抗體。

當等分與熒光團或酶結合的抗體時,保護它們免受光照很重要。暴露在光線下可能會導致熒光團光漂白或破壞與抗體結合的酶的結構。這將阻礙抗體產生信號的能力。

保持干凈

重要的是不要讓任何可能降低其性能的物質污染您的抗體。為避免污染抗體,最好在無菌條件下移取抗體并分裝抗體——以減少從同一管中移取的次數。

只取你需要的東西

解凍抗體時,只取出實驗所需數量的等分試樣,然后在冰上緩慢解凍。溫度的劇烈波動,例如加熱您手中的小瓶,可能會導致抗體不穩定。

如果您需要為同一實驗解凍多個等分試樣,請確保使用經過相同數量凍融循環的等分試樣,并將所有等分試樣的內容物匯集在一起,以確保您使用的是均質的抗體溶液。

在可能的情況下,避免重新冷凍已解凍的抗體也很重要。額外的凍融循環可能會損壞抗體的構象并降低其與其靶標結合的能力。如果您確實發現您為實驗解凍的等分試樣中殘留了抗體,如果要在接下來的幾周內使用,最好將它們保存在冰箱中,或者丟棄它們。

解凍

最后,在進行實驗時,將所有抗體保存在冰箱或冰上解凍,直到準備好使用它們,這一點很重要。這有助于保持抗體的構象和抗體與其靶標結合的能力。

我們希望通過遵循這些簡單的提示,您將能夠充分利用您在檢測中使用的任何抗體。與往常一樣,我們祝愿您的研究一切順利。

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